猪瘟蓝耳高致病CSFVPRRSV-UPRRSV-M荧光PCR说明书
【产品名称】
商品名称:猪瘟病毒/猪蓝耳病病毒通用型/高致病性猪蓝耳病病毒(CSFV/PRRSV-U/PRRSV-M)?核酸检测试剂盒(实时荧光-PCR法)
Name :Swine fever virus / porcine reproductive and respiratory syndrome virus universal / highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus (CSFV/PRRSV-U/PRRSV-M) nucleic acid detection kit (real-time fluorescence -PCR)
【包装规格】48T/盒
【预期用途】
禽流感是由A型流感病毒所引起的禽类疾病。猪瘟病毒/猪蓝耳病病毒通用型/高致病性猪蓝耳病病毒(CSFV/PRRSV-U/PRRSV-M)?除了感染禽类外,部分亚型也能够引起人感染或发病。野生水禽是禽流感病毒的自然宿主,一般对其不致病,当它们传染给其它物种时有时会造成大的发病率和死亡率。
本试剂盒适用于检测标本中的猪瘟病毒/猪蓝耳病病毒通用型/高致病性猪蓝耳病病毒(CSFV/PRRSV-U/PRRSV-M)?,适用于猪瘟病毒/猪蓝耳病病毒通用型/高致病性猪蓝耳病病毒(CSFV/PRRSV-U/PRRSV-M)?感染的辅助诊断及流行病学调查。
【检验原理】
本试剂盒分别对猪瘟病毒/猪蓝耳病病毒通用型/高致病性猪蓝耳病病毒(CSFV/PRRSV-U/PRRSV-M)?设计特异性的引物和探针,用一步法荧光RT-PCR技术对猪瘟病毒/猪蓝耳病病毒通用型/高致病性猪蓝耳病病毒(CSFV/PRRSV-U/PRRSV-M)??? RNA进行体外扩增检测。
【储存条件及有效期】
-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融少于 7 次,有效期 9 个月。
【标本采集】
病死或扑杀禽,取喉气管、脑、胸肌、心肌和肺等组织;待检活禽,用棉拭子取呼吸道分泌物或排泄物,置于 1mL 50%甘油生理盐水中。
【保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过 6 个月,标本运送应采用 2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融。
【使用方法】
1.样品处理(样本处理区)
1.1样本前处理
每份组织分别从 3 个不同的位置称取样品约 1g,手术剪剪碎混匀后取 0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中, 8000rpm 离心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中;棉拭子直接取 100 μL 提取。
1.2RNA 提取
推荐采用南昌垒佳数码科技有限公司生产的 RNA 提取试剂盒(离心柱提取法),请按照试剂盒说明书进行操作。
2.试剂配制(试剂准备区)
根据待检测样本总数,设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照;样品每满 7 份,多配制 1 份),每测试反应体系配制如下表:
3.加样(样本处理区)
将步骤 1 提取的 RNA、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL,分别加入相应的反应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心。
4.PCR 扩增(核酸扩增区)
4.1将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内;
4.3推荐循环参数设置:
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