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脑膜炎奈瑟菌A/C群(NM-AC荧光定量PCR试剂盒【检验原理】
本试剂盒采用探针法实时荧光 PCR 技术，设计一对脑膜炎奈瑟菌A/C群特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光 PCR 技术对脑膜炎奈瑟菌A/C群的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对病原学辅助诊断。
【储存条件及有效期】
-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融少于 7 次，有效期 12 个月。
【适用仪器】
ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
说明：不同批号的试剂盒组分不可交互使用。
1.1 结果判断
阳性：检测通道 Ct 值≤35.0，且曲线有明显的指数增长曲线。
可疑：检测通道 Ct 值>35.0，且出现典型扩增曲线的样本建议重复试验，重复试验结果出现 Ct 值≤35.0 和典型扩增曲线者为阳性，否则为阴性。
阴性：样本检测结果无 Ct 值且无明显的扩增曲线。
2. 检测方法的局限性
a. 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
b. 样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
c. 阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
d. 病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
e. 不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
f. 试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；
g. 本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
3. 质控标准
阴性质控品：无明显扩增曲线或无 Ct 值显示；
阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且 Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。
1.1 DNA 提取
1) 对上述处理好的标本加入等体积核酸提取液（固体标本加入50μL 核酸提取液）， 100℃恒温处理 10min，13,000 rpm 离心 5min，取上清液转移至新的 1.5mL EP 管，-20℃保存；
2) DNA 的提取也可以采用南昌垒佳数码科技有限公司生产的DNA 提取试剂盒（离心柱提取法），请严格按照试剂盒说明书进行操作。
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