溶血性链球菌A群(GAS)荧光定量PCR试剂盒是一种常用于检测和检验基因的试剂盒,它通过PCR技术,利用荧光信号来检测靶序列的存在和数量。
溶血性链球菌A群(GAS)荧光定量PCR试剂盒具备以下几个特点:
1. 可以检测非常小的DNA片段,也可以检测微量的DNA,因此具有高灵敏度的特点。
2. 具有高扩增效率,可以在短时间内扩增出大量的目标DNA片段。
3. 可以精准地分析和定量PCR反应体系中的DNA。它的分辨率较高,能够有效地区分靶序列和非靶序列,并且具有较低的误差率。
4. 使用简单方便,只需简单设置PCR反应条件即可,不需要使用复杂的设备和化学试剂。
5. 操作简单易学,不需要复杂的实验步骤和技能。
【储存条件及有效期】
-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融少于 7 次,有效期 12 个月。
【适用仪器】
ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
1.1 DNA 提取
1) 对上述处理好的标本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL 核酸提取液), 100℃恒温处理 10min,13,000 rpm 离心 5min,取上清液转移至新的 1.5mL EP 管,-20℃保存;
2) DNA 的提取也可以采用南昌垒佳数码科技有限公司生产的DNA 提取试剂盒(离心柱提取法),请严格按照试剂盒说明书进行操作。
2. 检测方法的局限性
a. 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关;
b. 样本提取过程中没有控制好交叉污染,会出现假阳性结果;
c. 阳性对照、扩增产物泄漏,会导致假阳性结果;
d. 病原体在流行过程中基因突变、重组,会导致假阴性结果;
f. 试剂运输,保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,出现假阴性或定量检测不准确的结果;
g. 本检测结果仅供参考,如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
1.1 结果判断
阳性:检测通道 Ct 值≤35.0,且曲线有明显的指数增长曲线。
可疑:检测通道 Ct 值>35.0,且出现典型扩增曲线的样本建议重复试验,重复试验结果出现 Ct 值≤35.0 和典型扩增曲线者为阳性,否则为阴性。
阴性:样本检测结果无 Ct 值且无明显的扩增曲线。
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